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多種細(xì)胞的培養(yǎng)方法HePG2細(xì)胞和L-02細(xì)胞的傳代：HePG2細(xì)胞屬人肝腫瘤的恒生細(xì)胞株，L-02細(xì)胞則是人胎肝細(xì)胞株，二者所使用的培養(yǎng)基可以是一樣的，即zui常見(jiàn)的DMEM。一干使用低糖的。細(xì)胞長(zhǎng)滿培養(yǎng)瓶時(shí)既要傳代。使用胰酶消化即可。用D-Hank's液配制成0.25%的胰酶。使用前37度預(yù)熱，細(xì)胞經(jīng)PBS清洗兩遍后，每個(gè)中號(hào)培養(yǎng)瓶加0.7ml的胰酶，胰酶的量可根據(jù)自己培養(yǎng)瓶的大小而定，原則就是能夠蓋滿瓶底。加入胰酶以后，為使酶的活性zui大，將培養(yǎng)瓶蓋擰緊后放回培養(yǎng)箱中...

ChromatinImmunoprecipitation(ChIP)實(shí)驗(yàn)技術(shù)總結(jié)ChIP是一項(xiàng)比較流行的研究轉(zhuǎn)錄因子（transcriptionfactor,TF）與啟動(dòng)子（promoter）相互結(jié)合的實(shí)驗(yàn)技術(shù)。由于ChIP采用甲醛固定活細(xì)胞或者組織的方法，所以能比較真實(shí)的反映細(xì)胞內(nèi)TF與Promoter的結(jié)合情況。當(dāng)用甲醛處理時(shí)，相互靠近的蛋白與蛋白，蛋白與核酸（DNA或RNA）之間會(huì)產(chǎn)生共價(jià)鍵。細(xì)胞內(nèi)，當(dāng)TF與Promoter相互結(jié)合（生物意義上的結(jié)合）時(shí)，它們必然靠的比...

基因編輯技術(shù)CRISPR-Cas9工具讓科學(xué)家?guī)缀跄茈S意改變基因組。人們稱(chēng)贊它比以往的技術(shù)明顯更簡(jiǎn)單、更廉價(jià)及更通用。CRISPR-Cas9在各地的實(shí)驗(yàn)室中大放光彩，并帶來(lái)了一些醫(yī)學(xué)和基礎(chǔ)研究的新應(yīng)用。但該技術(shù)也有其局限性。美國(guó)加州大學(xué)圣地亞哥分校生物工程師PrashantMali指出，它擅長(zhǎng)到基因組的一個(gè)特定位點(diǎn)，并在那里完成切割?！暗袝r(shí)候你感興趣的應(yīng)用還要多一點(diǎn)?！盵Argonaute]今年年初，研究人員懷著熱情撲向了一種名為NgAgo的新基因編輯系統(tǒng)。這也顯示了他們對(duì)...

原代肝細(xì)胞培養(yǎng)方法總結(jié)1、肝細(xì)胞培養(yǎng)液的組成（以100ml培養(yǎng)液為例）：DMEM90ml，10%胎牛血清10ml，肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子1-2ug，雙抗（100乘）1ml，胰島素500U/L、地塞米松0.4mg/L關(guān)于培養(yǎng)液添加內(nèi)容的解釋?zhuān)焊渭?xì)胞培養(yǎng)液中是否要添加肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子重組人肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子(r—hHGF）是zui強(qiáng)的促肝細(xì)胞分裂劑，在一定劑量范圍內(nèi)，r—hHGF與肝細(xì)胞DNA的合成有明顯的量效關(guān)系。肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子的劑量問(wèn)題：1ng/mlr-hHGF即可引起DNA合成顯著增加；...

細(xì)胞凍存、解凍方法與細(xì)胞計(jì)數(shù)細(xì)胞凍存、解凍方法與細(xì)胞計(jì)數(shù)一、細(xì)胞冷凍保存1.材料：生長(zhǎng)良好之培養(yǎng)細(xì)胞、新鮮培養(yǎng)基、DMSO(SigmaD-2650)、無(wú)菌塑料冷凍保存管(Nalgene5000-0020)、0.4％（w/v）trypanblue(GibcoBRL15250-061)、血球計(jì)數(shù)盤(pán)與蓋玻片、等速降溫機(jī)(KRYO10SeriesII)2、冷凍保存方法：（1）傳統(tǒng)方法:冷存管置于4℃10分鐘----20℃30分鐘----80℃16～18小時(shí)(或隔夜)---液氮槽vap...

日前，中國(guó)藥科大學(xué)科研人員在《中國(guó)野生植物資源》雜志上刊論文指出，以海南命名的*植物海南茄有護(hù)肝作用，可抑制肝硬化，并有抗氧化、抗慢性炎癥和止痛作用。海南茄為茄科植物海南茄的全株，系茄科茄屬的茄亞屬，別名細(xì)顛茄、金鈕頭、卜谷雀、衫鈕藤（儋州）等，《全國(guó)中草藥匯編》則記載：海南茄別名為金耳環(huán)，耳環(huán)錘。民間常用海南茄治療風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、酒精肝中毒、牙齦出血及蟲(chóng)蛇咬傷。海南茄為灌木，高1-2米，具黃土色基部寬扁的倒鉤刺；葉卵形至長(zhǎng)圓形；漿果球形；花期在春夏間，果期在秋冬間。據(jù)這篇名為...

貼壁細(xì)胞標(biāo)準(zhǔn)換液步驟一、準(zhǔn)備工作1.廢液缸2.吸管3.新鮮培養(yǎng)基4.油性記號(hào)筆/普通簽字筆5.實(shí)驗(yàn)記錄本二、實(shí)驗(yàn)步驟1.打開(kāi)層流，打開(kāi)層流間和超凈臺(tái)的紫外線燈，廢液缸和吸管同時(shí)照射；2.把水浴鍋調(diào)整到37℃并使其穩(wěn)定；3.將新鮮培養(yǎng)基放置到水浴鍋中，注意防止水面高于瓶肩，100ml液體保持10分鐘，（200ml液體保持15分鐘，500ml液體保持20分鐘），間或搖動(dòng)；4.著無(wú)菌服裝，帽子，口罩和手套5.用75%乙醇消毒培養(yǎng)基瓶外壁，放置到超凈臺(tái)上；6.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶取出，用75...

細(xì)胞傳代準(zhǔn)備工作3.1.1細(xì)胞傳代所需培養(yǎng)液及試劑需提前放置于生物安全柜內(nèi)預(yù)熱至室溫備用。3.1.2細(xì)胞傳代材料，滴管、移液管、培養(yǎng)器皿、計(jì)數(shù)板、橡皮乳頭。3.2細(xì)胞傳代步驟3.2.1人無(wú)菌室之前用肥皂洗手，用75％酒精擦拭消毒雙手。3.2.2細(xì)胞傳代前先在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)，確定細(xì)胞是否需要傳代及細(xì)胞需要稀釋的倍數(shù)觀察。3.2.3打開(kāi)超凈工作臺(tái)的紫外燈照射臺(tái)面30min左右，關(guān)閉超凈工作臺(tái)的紫外燈，打開(kāi)抽風(fēng)機(jī)清潔空氣，除去臭氧。3.2.4超凈工作臺(tái)面應(yīng)整潔，用75％酒...

隨著諾華（Novartis）和凱特（Kite）相繼提交生物制品上市申請(qǐng)，美國(guó)FDA批準(zhǔn)的CAR-T免疫細(xì)胞商業(yè)化療法大概率會(huì)在2017年上市，有望帶動(dòng)新的細(xì)胞治療熱潮興起。同時(shí)，越來(lái)越多的中國(guó)企業(yè)也在邁入免疫細(xì)胞治療前沿戰(zhàn)場(chǎng)。企業(yè)爭(zhēng)搶先機(jī)在細(xì)胞治療領(lǐng)域，多家醫(yī)藥公司紛紛發(fā)力，或與國(guó)外企業(yè)合作，或加速推進(jìn)自主研究。今年1月，復(fù)星醫(yī)藥公告，投資不超過(guò)8000萬(wàn)美元與Kite成立合資公司，雙方各占50%股權(quán)，開(kāi)拓癌癥T細(xì)胞免疫療法市場(chǎng)。合資公司將獲得KITE的KTE-C19在中國(guó)市...

精神分裂癥是一種涉及廣泛認(rèn)知和情緒障礙的腦疾病，工作記憶受損一直是其關(guān)鍵的認(rèn)知缺損標(biāo)記。精神分裂癥工作記憶的研究多采用言語(yǔ)或視覺(jué)空間的記憶材料。目前，對(duì)患者在動(dòng)作材料為主的工作記憶上是否存在缺損還缺乏研究。研究發(fā)現(xiàn)，在編碼和回憶階段加入動(dòng)作信息可顯著提升日常工作記憶表現(xiàn)（比如對(duì)語(yǔ)音指令的記憶），但動(dòng)作信息能否改善精神分裂癥患者的工作記憶還有待研究。為彌補(bǔ)這一研究空白，中國(guó)科學(xué)院心理研究所心理健康重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室博士呂世裕、助理研究員楊天笑、研究員陳楚僑及合作者采用新穎的指令記憶廣度...