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實(shí)戰(zhàn)分享|小鼠淋巴細(xì)胞的提取和分選之經(jīng)驗(yàn)小結(jié)
實(shí)驗(yàn)常用人肝癌細(xì)胞株(HepG2/Hep3B,HuH-7,MHCC97H,PLC/PRF/5)怎么選?
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法及注意事項(xiàng)
新聞中心/ News Center
重磅!開發(fā)出*有望治療一氧化碳中毒的蛋白分子在一項(xiàng)新的研究中,來(lái)自美國(guó)匹茲堡大學(xué)和維克森林大學(xué)的研究人員開發(fā)出一種逆轉(zhuǎn)小鼠一氧化碳(CO)中毒的蛋白,這一發(fā)現(xiàn)可能潛在地導(dǎo)致在人體中為這種經(jīng)常致命性的中毒開發(fā)出*解毒劑。相關(guān)研究結(jié)果發(fā)表在2016年12月7日那期ScienceTranslationalMedicine期刊上,論文標(biāo)題為“Five-coordinateH64Qneuroglobinasaligand-trapantidoteforcarbonmonoxidepoi...
購(gòu)買的細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因?研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯(cuò)誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯(cuò)誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過(guò)程錯(cuò)誤。冷凍細(xì)胞解凍后,加以洗滌細(xì)胞和離心。懸浮細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞。培養(yǎng)溫度使用錯(cuò)誤。細(xì)胞置于–80°C太久。
收到的冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因?yàn)椴僮髡邐A取冷凍管時(shí)用力不當(dāng),造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動(dòng)或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細(xì)胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時(shí),均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。
利用抗原親和純化多抗問(wèn)題首先,westernblot不能用來(lái)說(shuō)明抗體效價(jià),而需要在嚴(yán)格確定抗原濃度的情況下,通過(guò)ELISA等實(shí)驗(yàn)來(lái)說(shuō)明。因?yàn)閃B檢測(cè)的抗原蛋白是一種變性伸展的狀態(tài),而非活性狀態(tài);第二,1:200的抗血清稀釋度(甚至1:20)可以得到背景較小的條帶,你的實(shí)驗(yàn)可能需要充分washing及blocking,以減少非特異性吸附。第三,不知你用什么方法染色?注意時(shí)間不要太長(zhǎng),能看到你的條帶即可,一般用DAB染色不超過(guò)5min(2~3min,37C)。
免疫組化操作規(guī)程(一)、儀器設(shè)備1)18cm不銹鋼高壓鍋或電爐或醫(yī)用微波爐;2)水浴鍋(二)、試劑1)PBS緩沖液(pH7.2~7.4):NaCl137mmol/L,KCl2.7mmol/L,Na2HPO44.3mmol/L,KH2PO41.4mmol/L。2)0.01mol/L檸檬酸鹽緩沖液(CB,pH6.0,1000ml):檸檬酸三鈉3g,檸檬酸0.4g。3)0.5mol/LEDTA緩沖液(pH8.0):700ml水中溶解186.1gEDTA·2H2O,用10mmol/L...
單克隆抗體制備技術(shù)單克隆抗體制備技術(shù)單克隆抗體制備標(biāo)準(zhǔn)化操作方案(McAb-sop)*章:小鼠免疫第二章:細(xì)胞融合第三章:細(xì)胞建株第四章:細(xì)胞株鑒定第五章:腹水制備第六章:抗體純化和鑒定(略)*章.小鼠免疫(BALB/c)小鼠免疫是單抗制備的關(guān)鍵一環(huán),質(zhì)控小鼠免疫是制備單抗的*保證。一.小鼠免疫分兩程方案:根據(jù)免疫學(xué)原理小鼠免疫方案設(shè)計(jì)如下:1.短程免疫方案:*次:1d100ug(可溶性Ag)+等體積*佐劑.腹腔注射.0.4ml/只第二次:7d100ug+等體積不*佐劑腹腔注...
細(xì)胞總乙?;降目焖贉y(cè)定方法細(xì)胞總乙?;降目焖贉y(cè)定方法-------免疫親和色譜-ELISA方法步驟一:親和色譜分離提純乙?;鞍?.用細(xì)胞裂解液裂解細(xì)胞,10000rpm離心2分鐘,取上清備用。2.取20-40ul抗乙?;嚢彼峥贵w填料(Anti-acetylatedlysineAgarose,ICP0388,如右圖所示),用PBS洗2次,每次1ml。3.將細(xì)胞裂解上清液與洗好的填料(ICP0388)混勻,39oC旋轉(zhuǎn)搖床低速孵育60分鐘。4.1000rpm離心1分鐘...
別被忽悠了!白藜蘆醇并不能改善2型糖尿病患者的胰島素敏感性根據(jù)一項(xiàng)發(fā)表在學(xué)術(shù)期刊Diabetescare的研究,補(bǔ)充白藜蘆醇并不能改善2型糖尿病病人肝臟或外周的胰島素敏感性。在這項(xiàng)為期30天的隨機(jī)雙盲交叉研究中,來(lái)自荷蘭馬斯特里赫特大學(xué)的SilvieTimmers博士和他的同事們對(duì)17名血糖控制良好的2型糖尿病病人進(jìn)行了安慰劑或150mg/天的白藜蘆醇治療。研究人員發(fā)現(xiàn)肝臟和外周的胰島素敏感性并沒有受到白藜蘆醇治療的影響。與此類似,雖然肝內(nèi)脂質(zhì)含量與血漿白藜蘆醇水平呈現(xiàn)負(fù)相關(guān)...
新研究表明醫(yī)學(xué)進(jìn)展能夠改善乳腺癌治療zui近一項(xiàng)研究展示了如何利用醫(yī)學(xué)方法——腫瘤基因組檢測(cè)——幫助乳腺癌患者減少過(guò)度治療,將化療的作用zui大化。相關(guān)研究結(jié)果發(fā)表在學(xué)術(shù)期刊Cancer上。研究發(fā)現(xiàn)醫(yī)生建議和zui終治療決策與病情檢查結(jié)果高度相關(guān),表明腫瘤基因組檢測(cè)能夠幫助醫(yī)生辨別哪些病人能夠從化療中獲益zui大,哪些病人可以安全地停止化療治療。癌癥領(lǐng)域的大多數(shù)醫(yī)學(xué)研究都針對(duì)參與臨床試驗(yàn)的病人。幾乎沒有研究對(duì)于醫(yī)生如何利用生物標(biāo)記物檢測(cè)結(jié)果來(lái)推薦化療方案以及如何根據(jù)病人的經(jīng)歷...
癌細(xì)胞也會(huì)患阿爾茲海默氏癥!或點(diǎn)亮癌癥新療法近日,來(lái)自邁阿密大學(xué)米勒醫(yī)學(xué)院的研究人員通過(guò)研究發(fā)現(xiàn),在癌癥進(jìn)展及轉(zhuǎn)移過(guò)程中扮演重要角色的特定蛋白質(zhì)能夠在休眠的癌細(xì)胞中以淀粉樣體(Amyloidbodies)的形式儲(chǔ)存,一旦淀粉樣體分解,癌細(xì)胞就會(huì)再度活化,相關(guān)研究刊登于雜志DevelopmentalCell上。淀粉樣體被認(rèn)為在神經(jīng)性疾病的發(fā)生過(guò)程中扮演著重要角色,比如阿爾茲海默氏癥和帕金森疾病等,但淀粉樣體在癌癥進(jìn)展中的作用目前研究者并不清楚,本文研究發(fā)現(xiàn)就為研究人員從神經(jīng)科學(xué)...
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