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實(shí)戰(zhàn)分享|小鼠淋巴細(xì)胞的提取和分選之經(jīng)驗(yàn)小結(jié)
實(shí)驗(yàn)常用人肝癌細(xì)胞株(HepG2/Hep3B,HuH-7,MHCC97H,PLC/PRF/5)怎么選?
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法及注意事項(xiàng)
ELISA試劑盒組織勻漿液的細(xì)節(jié)處理:
1)將組織樣本用PBS(0.01M, PH 7.4)沖洗,洗去組織表面殘留的血液或雜質(zhì)。
2)將組織塊稱(chēng)重,記錄后剪碎,碎塊應(yīng)盡量小,便于勻漿得更充分。
3)將組織按一定的比例加入預(yù)冷的PBS(臨用前加入蛋白酶抑制劑)勻漿,勻漿時(shí)置于冰上或冰浴中。
4)吸取勻漿液到離心管,4℃5000×g離心5~10min,取上清,-20℃或-80℃保存,避免反復(fù)凍融。
ELISA試劑盒洗液的使用原則總結(jié):
A、同一批號(hào)的洗液用完了,建議采用同一項(xiàng)目的試劑洗液。
B、某一項(xiàng)目的洗液建議使用該試劑盒內(nèi)的洗液。
C、同一項(xiàng)目的洗液用完了,建議使用該項(xiàng)目其他廠家的洗液。
D、同一試劑盒洗液用完了,建議采用同一批號(hào)的洗液。
E、同一項(xiàng)目所有廠家都用完了,建議采用同一系列項(xiàng)目的洗液
F、不建議國(guó)產(chǎn)洗液與進(jìn)口洗液混用,也更不建議不同系列項(xiàng)目的洗液混用,這兩點(diǎn)都是因?yàn)橄匆旱呐渲贸煞植煌?,特別是不同項(xiàng)目的洗液(正規(guī)試劑廠家),主要組分都不太一樣。
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