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實(shí)戰(zhàn)分享|小鼠淋巴細(xì)胞的提取和分選之經(jīng)驗(yàn)小結(jié)
實(shí)驗(yàn)常用人肝癌細(xì)胞株(HepG2/Hep3B,HuH-7,MHCC97H,PLC/PRF/5)怎么選?
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法及注意事項(xiàng)
GIBCO中文版細(xì)胞培養(yǎng)手冊(cè)
細(xì)胞培養(yǎng)簡(jiǎn)介 . 2
什么是細(xì)胞培養(yǎng)? . 2
有限細(xì)胞系與連續(xù)細(xì)胞系 . 2
培養(yǎng)條件2
凍存 2
培養(yǎng)細(xì)胞的形態(tài) 3
細(xì)胞培養(yǎng)的應(yīng)用 3
細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室 4
安全 4
生物安全性等級(jí) 4
安全數(shù)據(jù)表 5
安全設(shè)備 5
個(gè)人防護(hù)設(shè)備 (PPE) . 5
實(shí)驗(yàn)室安全規(guī)范 5
細(xì)胞培養(yǎng)設(shè)備 . 6
基本設(shè)備 6
擴(kuò)增設(shè)備 6
其他用品. 6
細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室 . 7
無(wú)菌工作區(qū)域 . 7
細(xì)胞培養(yǎng)通風(fēng)櫥 7
細(xì)胞培養(yǎng)通風(fēng)櫥布局 . 8
培養(yǎng)箱 . 9
儲(chǔ)存 9
低溫儲(chǔ)存 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .10
細(xì)胞計(jì)數(shù)器 10
無(wú)菌技術(shù) 11
簡(jiǎn)介 11
無(wú)菌工作區(qū)域 . 11
良好的個(gè)人衛(wèi)生 11
無(wú)菌試劑和培養(yǎng)基 . 12
無(wú)菌操作12
無(wú)菌技術(shù)核對(duì)表 . 13
ii | 細(xì)胞培養(yǎng)基本知識(shí)
目錄
生物污染 14
簡(jiǎn)介 14
細(xì)菌 . 14
酵母 15
霉菌 15
病毒 16
支原體 . 16
交叉污染 .17
抗生素的使用 . 17
細(xì)胞培養(yǎng)基本知識(shí) 18
細(xì)胞系 18
選擇合適的細(xì)胞系 . 18
獲取細(xì)胞系 18
培養(yǎng)環(huán)境 19
貼壁培養(yǎng)與懸浮培養(yǎng) . 19
培養(yǎng)基 . 20
pH 值 . 21
二氧化碳 .21
溫度 21
細(xì)胞形態(tài) 22
哺乳動(dòng)物細(xì)胞 . 22
哺乳動(dòng)物細(xì)胞形態(tài)差異 22
293 細(xì)胞的形態(tài) . 23
昆蟲細(xì)胞 24
Sf21 細(xì)胞的形態(tài) 24
Sf9 細(xì)胞的形態(tài) 25
方法 26
細(xì)胞培養(yǎng)維持指導(dǎo)原則 26
什么是傳代? . 26
何時(shí)傳代? 27
常用細(xì)胞系推薦使用培養(yǎng)基 28
貼壁細(xì)胞的解離 30
TrypLE. 解離酶 30
貼壁細(xì)胞的傳代 . 31
所需材料 31
貼壁細(xì)胞傳代流程 . 31
貼壁昆蟲細(xì)胞傳代的注意事項(xiàng) 32
細(xì)胞培養(yǎng)基本知識(shí) | iii
目錄
懸浮細(xì)胞的傳代 . 33
懸浮細(xì)胞的傳代 33
懸浮培養(yǎng)容器 . 33
所需材料 34
懸浮細(xì)胞傳代流程 . 34
懸浮昆蟲細(xì)胞傳代的注意事項(xiàng) 36
細(xì)胞的冷凍 . 37
凍存 37
細(xì)胞凍存指導(dǎo)原則 . 37
凍存培養(yǎng)基 38
所需材料 38
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案 . 39
冷凍細(xì)胞的解凍 . 40
細(xì)胞解凍指導(dǎo)原則 . 40
所需材料40
冷凍細(xì)胞解凍方案 . 40
支持技術(shù)方案 . 41
利用血球計(jì)數(shù)器進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù) 41
臺(tái)盼藍(lán)拒染法 . 42
濃縮細(xì)胞42
附錄 43
疑難解析 43
細(xì)胞培養(yǎng)產(chǎn)品 . 44
細(xì)胞系 . 44
哺乳動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)基 . 45
昆蟲細(xì)胞培養(yǎng)基 46
細(xì)胞培養(yǎng)用血清產(chǎn)品 . 46
細(xì)胞培養(yǎng)用實(shí)驗(yàn)試劑 . 47
抗生素和抗真菌劑 . 48
細(xì)胞培養(yǎng)用輔助產(chǎn)品 . 49
生長(zhǎng)因子和純化蛋白 . 49
轉(zhuǎn)染和選擇 50
轉(zhuǎn)染試劑 51
其他資源 52
哺乳動(dòng)物細(xì)胞和昆蟲細(xì)胞培養(yǎng) 52
細(xì)胞與組織分析 52
轉(zhuǎn)染選擇工具 . 52
安全數(shù)據(jù)表 52
分析證書 52
53
iv | 細(xì)胞培
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