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實(shí)戰(zhàn)分享|小鼠淋巴細(xì)胞的提取和分選之經(jīng)驗(yàn)小結(jié)
實(shí)驗(yàn)常用人肝癌細(xì)胞株(HepG2/Hep3B,HuH-7,MHCC97H,PLC/PRF/5)怎么選?
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法及注意事項(xiàng)
ELISA 標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)制作方法
一般而言,我們擬合ELISA標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)選用比較經(jīng)典的Curve Expert 1.3或者Curve Expert 1.4軟件。現(xiàn)在我們以Curve Expert 1.4為例,對(duì)ELISA標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)繪制方法進(jìn)行詳述。
1. 點(diǎn)擊Curve Expert 1.4,打開(kāi)應(yīng)用程序,截圖界面如下:
2.在X軸輸入標(biāo)準(zhǔn)品的OD值,Y軸輸入相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)品的濃度,截圖界面如下:
3. 單擊上圖界面中的 圖標(biāo),出現(xiàn)如下界面
4. 單擊上圖界面中的ALL OFF 按鈕,出現(xiàn)如下界面
5. 我們選擇Sigmoidal Models這種曲線(xiàn)擬合模型進(jìn)行ELISA標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的擬合,點(diǎn)擊OK,出現(xiàn)下圖界面:
注意:上圖界面中的r值越高,即當(dāng)r值越接近1時(shí),所擬合的曲線(xiàn)就越好,所得到的數(shù)值可靠性也就也高。
6. 在上圖空白界面,按[Ctrl]鍵+[L]鍵,出現(xiàn)如下界面
在上圖中輸入相應(yīng)的OD值(X值)后,點(diǎn)擊Calculate即可計(jì)算出待測(cè)物的濃度(Y值),待測(cè)物稀釋了多少倍就在所測(cè)值的基礎(chǔ)上乘以稀釋倍數(shù)即zui終濃度。
7. 點(diǎn)擊所繪制的曲線(xiàn)圖中左上方 按鈕,可以得到如下ELISA曲線(xiàn)擬合方程
8. 點(diǎn)擊下圖中 Copy 即可得到上圖界面中的曲線(xiàn)方程數(shù)據(jù)
Logistic Model: y=a/(1+b*exp(-cx))
Coefficient Data:
a = -1.19763443774E+004
b = -8.45403498052E+001
c = 1.30213993104E+000
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