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實戰(zhàn)分享|小鼠淋巴細胞的提取和分選之經(jīng)驗小結(jié)
產(chǎn)品展示/ Product display
禽皰疹病毒通用PCR試劑盒是群中等小的雙股 DNA 病毒,根據(jù)其理化性質(zhì)分 α、β、γ、未分類皰疹病毒四個亞科。皰疹病毒感染的宿主范圍廣泛,可感染人類和其他脊椎動物。在自然界廣泛存在,主要侵犯外胚層發(fā)育而成的組織,例如:皮膚、粘膜和神經(jīng)組織。
聯(lián)系電話:15221858802
品牌 | 其他品牌 | 貨號 | XY-0065 |
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規(guī)格 | 50T | 供貨周期 | 一周 |
主要用途 | 熒光定量PCR具有更高的擴增效率、更高的擴增靈敏度、更高的擴增特異性。 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁 |
禽皰疹病毒通用PCR試劑盒
Aspergillus spp.
產(chǎn)品及特點
禽皰疹病毒(Avian Herpesvirus,Gallid Herpesvirus,GaHV) 會引起眾 多禽類感染病,如雞馬立克氏病,其特征為外周神經(jīng)淋巴樣細胞浸潤和增大, 引起肢(翅)麻痹,以及性腺、虹膜、各種臟器、肌肉和皮膚腫瘤病灶。本病 是一種世界性疾病,目前是危害養(yǎng)雞業(yè)健康發(fā)展的三大主要疫?。R立克氏病、 雞新城疫及雞傳染性法氏囊?。┲唬痣u群較高的發(fā)病率和死亡率,對養(yǎng) 殖業(yè)造成嚴(yán)重損害,因此禽皰疹病毒的快速準(zhǔn)確鑒定對該病的預(yù)防和檢疫有著 重要作用,為此本公司開發(fā)了簡單快捷的禽皰疹病毒通用 PCR 檢測試劑盒, 它具有下列特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供 DNA 模板。
2. 引物經(jīng)過精心優(yōu)化,專一性強,只擴增曲霉屬,與其他病原沒有交叉反應(yīng)。
3. 提供陽性對照,便于區(qū)分假陰性樣品。
4. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。
5. 本試劑盒足夠做 40μL 體系的 PCR 50 次。
6. 本產(chǎn)品只能用于科研。
禽皰疹病毒通用PCR試劑盒規(guī)格及成分
編號 | 成分 | 規(guī)格 |
試劑一 | PCR Magic Mix 3.0 | 1 mL(紅蓋) |
試劑二 | 超純水 | 1 mL(亮黃蓋) |
試劑三 | 禽皰疹病毒通用 PCR 引物混合液 | 100 μL(白蓋) |
試劑四 | 禽皰疹病毒通用 PCR 陽性對照 (1×10E8 拷貝/μL) | 50 μL(黃蓋) |
試劑五 | 天凈沙核酸釋放劑(試用裝) | 20 次(1mL、綠蓋) |
試劑六 | 使用手冊 | 1 份 |
運輸及保存 低溫運輸,-20℃保存,保存期限為一年。陽性對照需要單獨放置,不要污染其 他試劑。
自備試劑 樣品 DNA。
使用方法 一、樣品 DNA 的制備
1. 如果有 N 個樣品,必須設(shè)置 N+2 個提取,多出的一個是 PC(樣品制備陽 性對照),一個是 NC(樣品制備陰性對照)。可以用 10μL 的陽性對照再加 上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為 PC。另外用 水作為 NC。
2. 用自選方法純化樣品的 DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒 DNA 提取試 劑盒兼容
二、設(shè)置 PCR 反應(yīng)(40 μL 體系)
3. 對 N+2 個樣品,在 PCR 時需要增加一個 PCR 陽性對照和一個 PCR 陰性 對照,故需要設(shè)置 N+4 個反應(yīng)。在 N+4 個 PCR 管中分別加入下列成分:
成分 | 樣品管 N+2 個 | PCR 陰性 對照管 | PCR 陽性 對照管 |
PCR Magic Mix 3.0 | 各20 μL | 20 μL | 20 μL |
禽皰疹病毒 PCR 引物混合液 | 各2 μL | 2 μL | 2 μL |
N+2 個樣品 DNA 模板 | 各 18 μL | ||
PCR 陰性對照(超純水) |
| 18 μL |
|
PCR 陽性對照(煙曲霉 PCR 陽性對 照的 10000 倍稀釋液) | 18 μL |
4. 按下表設(shè)置 PCR 反應(yīng)
過程 | 溫度 | 時間 |
預(yù)變性 | 95℃ | 5 min |
PCR 反應(yīng) (35個循環(huán)) | 95℃ | 30 sec |
72℃ | 30 sec | |
后延伸 | 72℃ | 5 min |
三、電泳檢測
5. 取 10-20 μL PCR 產(chǎn)物。電泳檢測 PCR 產(chǎn)物。本產(chǎn)品提供的 PCR Mix 在擴增結(jié)束后可以直接上樣,不需要另外再加 loading buffer。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 471bp。陽性對照必須有此條帶出現(xiàn),陰性對照必須無任何擴 增,否則實驗無效。對沒有擴增產(chǎn)物的樣品,可以稀釋 10 倍后重復(fù) PCR 擴增以排除 PCR 抑制劑的感染。
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